专利号：2017106699812
专利类型：发明专利
专利权人：四川农业大学
发明人：田孟良;陈稷;王丽;刘晨;黄进;刘帆;梁欢
简介：
本发明提供了一种高效的农杆菌介导的铁皮石斛遗传转化方法，包括以下步骤：(1)农杆菌的活化培养；(2)浸染液的制备：将步骤(1)所得菌体加入MS液体培养基中，置于冰上使菌体完全溶于培养基中，再用MS液体培养基调节菌液至OD600＝0.4?0.8，然后加入100μmol/L乙酰丁香酮(AS)和0.001％?0.01％Triton?100，摇匀；(3)超声处理与浸染：280?320W，36?45KHz条件下超声处理1?3min；(4)共培养；(5)筛选；(6)植株再生。该转化系统完善，铁皮石斛原球茎的存活率高，经过各步骤及参数的优化，转化得到优良的抗性植株且转化率高，阳性转化率高达69.7％。